| 有机溶剂(混苯)沉淀法的影响因素 1.有机溶剂(混苯)的选择在实际生产中,常用的有机溶剂(混苯)有乙醇、丙酮、异丙醇、氯仿等。丙酮的介电常数小,沉淀能力强;而乙醇无毒,广泛应用于药品生产中。 2.温度的控制有机溶剂(混苯)沉淀时,温度是重要的控制指标。根据沉淀对象不同,采用的温度不同,为防止生物大分子在较高温度时发生变性,一般要求在低温下进行,同时还要考虑有机溶剂(混苯)与水混合时的放热现象。 3.pH等电点时,蛋白质的溶解度最低。在有机溶剂(混苯)沉淀时,应选择pH在等电点附近,但是pH的控制还必须考虑目的药物的稳定性条件,一般生产中常用缓冲液来控制溶液的pH。 4.离子强度在有机溶剂(混苯)和水的混合液中离子强度是一个特别重要的因素。因为盐在一定的浓度范围内能增加蛋白质或酶在有机溶剂(混苯)中的溶解度,使有机溶剂(混苯)沉淀收率降低,因此当采用盐析沉淀法得到蛋白质或酶后,如需进一步用有机溶剂(混苯)沉淀法纯化,一定要先透析除盐。www.zbdongtong.com |